产品货号:
SY0434
中文名称:
抗V5标签亲和纯化凝胶
英文名称:
Anti-V5 Affinity Gel
产品规格:
1mL|5mL|25mL|100mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本制品由高质量的鼠源IgG2b单克隆抗体与Sepharose 4B gel通过供价偶联制备,本制品具有较高的V5标签融合蛋白加载容量(至少为0.5mg protein/mL凝胶),杂蛋白非特异结合少,可用于带有V5标签的融合蛋白免疫沉淀(IP)和纯化。推荐使用量:每500μL蛋白粗体液需使用5μL凝胶。
克隆号 | 10B5 |
亚型 | Mouse IgG1 |
纯化方法 | Protein A |
抗体浓度 | 7.5g抗体/L凝胶 |
应用 | 蛋白纯化,免疫沉淀(IP) |
蛋白结合量 | ≥0.5mg蛋白/mL凝胶 |
储存缓冲液 | 10mM Na3PO4,150mM NaCl,50%甘油,pH7.4,含有0.02%(w/v)叠氮钠 |
组分 | 1mL | 5mL | 25mL | 100mL |
抗V5标签亲和纯化凝胶 | 1mL | 5mL | 25mL | 100mL |
说明书 | 1份 |
保存:-20℃,有效期1年。禁止在不含甘油的溶液中冻存。
- 轻微重悬Anti-V5 Affinity Gel,形成均一溶液。转移10μL混合液(5μL gel)至新的离心管中。
- 加入600μL TBS,轻轻的重悬Anti-V5 Affinity Gel,10000rpm离心30 s,弃上清,重复上述步骤3~4次。
注意:尽可能去除上清,但不要吸到凝胶。重复该步骤3~4次。 - 在上述沉淀中加入200~1000μL细胞裂解液。4℃,轻摇孵育2小时。
- 10000rpm离心30 s,上清液转移到新的离心管中保存以后检测。
- 凝胶沉淀用0.5mL TBS洗3~4次,直至上清OD280 <0.05。
- 洗脱:具体选择哪种洗脱条件取决于目的蛋白的特性或下游应用。
- 加入100μL V5多肽(150μg/mL,货号:SY0425)洗脱V5融合蛋白,4℃轻摇孵育30min,10000rpm离心30 s,收集上清。
- 用于SDS-PAGE电泳:加入10μL 2×蛋白上样缓冲液,煮沸5min。10000rpm离心30 s,小心转移上清,用于SDS-PAGE检测。上样缓冲液中SDS会破坏抗体,所以亲和纯化凝胶不能重复使用。
- 加入100μL V5多肽(150μg/mL,货号:SY0425)洗脱V5融合蛋白,4℃轻摇孵育30min,10000rpm离心30 s,收集上清。
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